血清是一種培養(yǎng)基，含有細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需的多種營(yíng)養(yǎng)成分，如蛋白質(zhì)、多肽等，多用于細(xì)胞培養(yǎng)、生物制品及診斷試劑的生產(chǎn)。 血清的主要成分是蛋白質(zhì)，血清的組成成分與含量常常與供血?jiǎng)游镄詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件有關(guān)。
那么如何挑選合適的血清？使用血清時(shí)，需要注意哪些問(wèn)題？現(xiàn)在我們一起來(lái)看看。
1.胎牛血清和新生牛血清的區(qū)別是什么？
取血年齡不同：牛血清按照牛取血時(shí)間或牛齡可進(jìn)行區(qū)分。胎牛血清（FoetalBovineSerum，簡(jiǎn)稱(chēng)FBS）指的是取自未出生，母牛剖腹得來(lái)的胎牛。
國(guó)產(chǎn)胎牛血清（并無(wú)明確定義，但通常以此稱(chēng)）的指的是出生4-6小時(shí)，且未進(jìn)行哺乳（unsuckled）進(jìn)食的牛，有時(shí)還稱(chēng)作國(guó)產(chǎn)新生牛。
新生牛血清（NewbornCalfSerum，簡(jiǎn)稱(chēng)NBCS）指的是出生14天-3個(gè)月進(jìn)行取血的牛。
成年牛血清（AdultBovineSerum，簡(jiǎn)稱(chēng)ABS）指的是取血時(shí)牛齡通常超過(guò)12個(gè)月的牛。
以上取血牛齡的差異主要是受當(dāng)?shù)貒?guó)家畜牧業(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響，因?yàn)榕Ｑ酁樾竽翗I(yè)副產(chǎn)業(yè)，并未有專(zhuān)門(mén)為取血而養(yǎng)的牛。
組分與比例不同：這幾種不同牛齡血清所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規(guī)來(lái)說(shuō)，年齡越小的牛血清，細(xì)胞培養(yǎng)效果越好。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛，且因?yàn)樘ヅＮ催M(jìn)食過(guò)母乳，所以IgG含量低。
用途與用法不同：根據(jù)細(xì)胞所需生長(zhǎng)條件可確定。
2.如何挑選適合細(xì)胞生長(zhǎng)的血清？
原代或是正常細(xì)胞株建議使用BI特級(jí)胎牛血清，對(duì)生長(zhǎng)條件要求高的細(xì)胞和干細(xì)胞可選用專(zhuān)用特級(jí)胎牛血清，或胚胎干細(xì)胞專(zhuān)用金牌胎牛血清。
由于血清有批間差異，細(xì)胞種類(lèi)不同，我們建議客戶(hù)購(gòu)買(mǎi)前可先申請(qǐng)?jiān)囉脴悠罚ㄟ^(guò)篩選得到滿(mǎn)意的血清批號(hào)，之后根據(jù)項(xiàng)目需求可進(jìn)行批量囤貨，以保證該項(xiàng)目所需血清質(zhì)量的一致性，可排除不同批號(hào)血清對(duì)于實(shí)驗(yàn)帶來(lái)的影響。
3.如何正確保存血清？
需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃冰箱（未開(kāi)封血清有效期為5年）。若存放于4℃，請(qǐng)勿超過(guò)1個(gè)月，若一次無(wú)法用完一瓶，建議將血清無(wú)菌分裝并冷凍。
4.如何解凍血清？
血清解凍需采用逐步解凍法：將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天，然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍，這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)并出現(xiàn)沉淀。
5.需要對(duì)新買(mǎi)的血清進(jìn)行過(guò)濾嗎？
血清在ISO13485認(rèn)證的廠(chǎng)房中生產(chǎn)，經(jīng)過(guò)3次0.1μm過(guò)濾，出廠(chǎng)經(jīng)過(guò)檢測(cè)并且會(huì)使用三種以上的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)測(cè)試及無(wú)菌檢測(cè)，污染幾率非常低。通常細(xì)胞污染有非常多的可能性，根據(jù)協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測(cè)，結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染。因此買(mǎi)來(lái)的血清不需要再次進(jìn)行過(guò)濾。
6.除了對(duì)血清進(jìn)行檢測(cè)，有何更直觀(guān)的方式分辨血清質(zhì)量？
目測(cè)法，我們可根據(jù)血清的顏色，沉淀，澄清度等進(jìn)行區(qū)分。
顏色：顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同，可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進(jìn)口血清質(zhì)量的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色，較差質(zhì)量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)模捎谘t蛋白的破壞氧化，會(huì)呈現(xiàn)出暗紅色，甚至咖啡色。
沉淀：血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生。沉淀產(chǎn)生的原因很多，使用時(shí)反復(fù)凍融會(huì)增加沉淀。進(jìn)口血清過(guò)濾分裝前很少反復(fù)凍融，因此成品清澈。
澄清度：進(jìn)口血清是由于蛋白和脂類(lèi)等物質(zhì)含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡。國(guó)產(chǎn)血清絕大多數(shù)為新生牛血清，相對(duì)而言更加粘稠，顏色略深。
7.為何血清會(huì)存在批間差？如何避免此影響？
因?yàn)檠鍋?lái)源于動(dòng)物，其組成成分有1000種左右，每個(gè)批號(hào)的組分和組分含量都是不固定的，因此批間差異是可能存在的。
為了避免批間差異對(duì)細(xì)胞的影響，XP建議先進(jìn)行批號(hào)測(cè)試，篩選合適的批號(hào)，備好庫(kù)存（血清未開(kāi)封時(shí)，在-20℃下可保存5年）。如需更換血清批次或產(chǎn)地，建議先試用后再大量訂購(gòu)。
8.血清中沉淀是什么成分？造成原因有哪些？如何預(yù)防和處理沉淀？
血清中沉淀主要有：纖維蛋白（絮狀沉淀），甲胎蛋白，脂蛋白，冷凝集素，玻粘連蛋白，磷酸鈣[1]（顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀），膽固醇等。
原因：造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活，反復(fù)凍融，長(zhǎng)期儲(chǔ)存于2-8℃或者室溫。
預(yù)防措施與建議：因此不立即使用的血清應(yīng)保存在-20℃或以下。
9.血清為何要熱滅活，有必要對(duì)所有血清都滅活嗎？如何正確的進(jìn)行滅活？
加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。啟動(dòng)的補(bǔ)體系統(tǒng)參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，啟動(dòng)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞活化。在免疫學(xué)研究中，培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。
實(shí)驗(yàn)顯示，熱滅活血清對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的，對(duì)于非必須的細(xì)胞來(lái)說(shuō)血清滅活對(duì)于細(xì)胞生長(zhǎng)只有微小甚至無(wú)任何作用，還可能造成生長(zhǎng)速率降低，沉淀物還會(huì)顯著增多，不利于細(xì)胞觀(guān)察。因此，若非必須，不需要對(duì)血清進(jìn)行滅活處理。
將需要進(jìn)行處理的血清置于56℃水浴30min，建議加放空白對(duì)照（同體積水）使用溫度計(jì)測(cè)溫，以測(cè)得溫度為56℃時(shí)為計(jì)時(shí)起始點(diǎn)，加熱中可不時(shí)輕度旋轉(zhuǎn)混勻血清。
