SBI無外泌體血清的樣品制備知識探究
發布日期:2020-07-17 瀏覽次數:764
SBI無外泌體血清可特異性激發一些細胞反應,表明它們可以在作為治療遞送載體方面有巨大的潛力。無外泌體血清的囊泡性質使得它們適合作為用于藥物或核酸遞送的潛在納米載體。無外泌體血清的大小分布也會影響外泌體的治療潛力。利用聚合物沉淀分離的外泌體比超離法的粒子分布要小,劃痕實驗證實聚合物沉淀所得的小粒徑的外泌體被細胞攝取后遷移更快。 SBI無外泌體血清常規血液制備可分為兩類,即抗凝血和非抗凝血:
1.抗凝血常
采血前,預先在采血管中加入抗凝劑(EDTA或肝素鈉)采集血液完畢后密封貼上標簽,低溫冷藏運送到實驗室。必要時需要可在血液中加入雙抗(鏈霉素和青霉素)以抑制血源性或采血過程中污染細菌。
其中EDTA是一種強力抗凝劑,既能抗凝又能保護DNA,所以可以作為核酸檢測中使用的抗凝劑好;而肝素鈉因為其對DNA聚合酶的強烈抑制性,造成PCR檢測出現假陰性,也可造成紅細胞吸附試驗(HAD)假陽性,所以采血過程應當做好抗凝劑的選取。
2.非抗凝血
即不加抗凝劑的血液,待血液凝固后析出血清可做血清學檢測試驗。
SBI無外泌體血清的分離方法:
夏日將血液室溫傾斜靜置1-2小時(防止暴曬),待血液凝固,自然析出血清即可收集。冬日將收集管放置在25-37°環境中1小時,必要時使用離心機低速,低溫離心處理,1500-2500轉/分離心5分鐘。待血清析出后分裝到小塑料離心管內,蓋緊蓋子,封口,標記,4℃冷藏;需長期保存時,將血清置于-20℃冷凍即可。